Oo talaga, kung ang chloroform ay hindi maayos na naalis sa paghahanda ng phage. Ang chloroform ay karaniwang idinaragdag sa phage isolation/purification step para maalis ang bacteria. … Ang chloroform ay hindi isang mahalagang hakbang at dapat itong isaalang-alang na maaaring hindi aktibo ang iba pang mga phage na nasa bacteria.
Ano ang nagagawa ng chloroform sa E coli?
Chloroform sa kontekstong ito mabilis na pumapatay ng bacteria. Maaari mong patunayan sa pamamagitan ng titering para sa CFU bago at pagkatapos ng pag-alog gamit ang CHCl3. Upang makakuha ng bagong phage mula sa induced bacteria ay tumatagal ng ilang sandali (ang nakatagong panahon mula sa induction) at hindi malamang mula sa mabilis na napatay na bacteria.
Ano ang papel ng chloroform sa paghihiwalay ng bacteriophage?
Na may coli-phages chloroform treatment ay karaniwang ginagamit upang patayin ang anumang bacteria na naroroon at ang filter-sterilization step ay minsan ay inalis. Maaaring hindi aktibo ng chloroform ang ilang mga phage at dapat gamitin nang may pag-iingat at wastong mga kontrol. Maaari ding gamitin ang sodium azide para sa ilang phage.
Ano ang gamit ng chloroform sa paghahanda ng lysate sa panahon ng phage isolation?
Ang chloroform ay idinaragdag sa loob ng 15-20 min upang i-lyse ang mga cell upang ilabas ang ang mga particle ng virus sa medium.
Paano mo ihihiwalay ang mga bacteriophage?
Ang paghihiwalay ng mga bacteriophage para sa phage therapy ay kadalasang ipinapakita bilang isang medyo prangka pagsasanay ng paghahalo ng sample na naglalaman ng phage sa host bacteria, na sinusundan ng simpleng pag-alis ng mga bacterial debrissa pamamagitan ng pagsasala at/o centrifugation sa susunod na araw [1, 2, 3].
