Ang produkto ng restriction digestion ay madaling maimbak sa -20 C. Sa 4 C ito ay ayos lang ngunit para matiyak na walang aktibidad at walang star activity ito ay inirerekomenda na panatilihin ito sa -20 C.
Paano mo iniimbak ang natunaw na DNA?
Subukan ang imbak ang gel slice sa refrigerator magdamag, o kahit na tunawin ang slice sa buffer at i-freeze ito sa -20°C o -80°C. Ang pagkasira ng DNA ay magaganap sa parehong bilis at sa ilalim ng parehong mga kondisyon tulad ng natutunaw na DNA, kaya gumamit ng mas malamig na temperatura para sa mas mahabang imbakan.
Ano ang ibig sabihin ng natutunaw ang isang plasmid?
Purified plasmid DNA ay digested gamit ang 1 o higit pang restriction enzymes (REs) na pinili upang magbigay ng natatanging DNA band pattern na madaling naresolba ng electrophoresis. … Ang mga restriction enzymes na pumuputol sa loob ng multiple cloning site (MCS) at nagreresulta sa diagnostic pattern ng 2-5 na madaling lutasin na mga banda ay karaniwang pinipili.
Paano ka nag-iimbak ng mga linearized na plasmid?
Kung nag-aalala ka tungkol sa mga downstream na epekto ng TE, itabi ang DNA sa mas mataas na konsentrasyon at i-dilute kung kinakailangan, o gumamit ng "mababang TE" na 10 mM Tris / 0.1 mM EDTA. kapag malinis ang DNA o RNA maaari itong maimbak sa -20C sa loob ng maraming buwan nang walang anumang pagkasira.
Gaano katagal mo mapapanatili ang restriction digest?
Pro-Tip Depende sa aplikasyon at dami ng DNA sa reaksyon, ang oras ng incubation ay maaaring mula 45 mins hanggang magdamag. Para sa mga diagnostic digest, ang 1-2 oras ay kadalasang sapat. Para sa mga digest na may >1 µg ng DNA na ginagamit para sa pag-clone, inirerekomendang mag-digest ka nang hindi bababa sa 4 na oras.