Ang Trypsinization ay ang proseso ng cell dissociation gamit ang trypsin, isang proteolytic enzyme na sumisira sa mga protina, upang ihiwalay ang mga nakadikit na cell mula sa sisidlan kung saan sila niluluto. Kapag idinagdag sa isang cell culture, sinisira ng trypsin ang mga protina na nagbibigay-daan sa mga cell na dumikit sa sisidlan.
Bakit natin ginagawang Trypsinize ang mga cell?
Ang
Trypsinization ay kadalasang ginagawa upang pahintulutan ang pagdaan ng mga cell sa isang bagong lalagyan, obserbasyon para sa eksperimento, o pagbabawas ng antas ng pagkakadikit sa flask sa pamamagitan ng pag-alis ng porsyento ng ang mga cell.
Paano gumagana ang trypsin sa pagtanggal ng mga cell?
Ang
Trypsin/EDTA ay isang pinagsamang paraan para sa pagtanggal ng mga cell. Pinutol ng Trypsin ang mga adhesion protein sa cell-cell at cell-matrix na pakikipag-ugnayan sa pamamagitan ng pagputol sa amino acid ng mga adhesion protein partikular sa lysine o aginine sa C-terminal kung ang upstream amino acid ay hindi proline.
Paano ka makakakuha ng trypsinized adherent cells?
Procedure
- Alisin ang medium mula sa culture vessel sa pamamagitan ng aspiration at hugasan ang monolayer gamit ang s alt solution na walang Ca2+ at Mg 2+ para alisin ang lahat ng bakas ng serum. …
- Magbigay ng sapat na trypsin o trypsin/EDTA na solusyon sa (mga) culture vessel upang ganap na takpan ang monolayer ng mga cell at ilagay sa 37 °C incubator sa loob ng ~2 minuto.
Paano ko idi-disable ang trypsin sa cell culture?
Kapag lumitaw ang mga cell na hiwalay, magdagdag ng 2 volumeng pre-warmed complete growth media para hindi aktibo ang trypsin. Dahan-dahang i-disperse ang medium sa pamamagitan ng pagpippet sa ibabaw ng cell layer nang ilang beses upang matiyak ang pagbawi ng >95% ng mga cell. Para sa mga serum free culture, Soybean trypsin inhibitor (Product No.
