Sa nakalipas na mga taon, ginamit ni Coriell ang lahat ng heat-inactivated na serum para sa mga cell culture nito upang hindi aktibo ang complement protein na matatagpuan sa bagong panganak na calf serum. Dahil nagbago kami sa fetal bovine serum, nalaman namin na ang heat inactivation ay hindi kailangan para sa karamihan ng mga cell line.
Gaano katagal ka nag-iinit inactivate ang FBS?
Ang sumusunod na protocol ay iminungkahi para sa heat inactivation ng fetal bovine serum (FBS). Ang FBS ay pinainit sa 56± 2°C para sa 30±2 minuto sa agitating water-bath. Heat Inactivation (HI) – isang proseso kung saan pinapanatili ang FBS sa temperatura na 56± 2° sa loob ng 30± 2 minuto.
Bakit kailangan ang heat inactivation para sa FBS bago gamitin?
Ang karaniwang paggamot sa FBS ay heat-inactivation, kung saan ang FBS ay pinainit sa 56°C sa loob ng 30 minuto sa isang paliguan ng tubig na may paminsan-minsang pag-alog. Ang layunin ay upang i-inactivate ang anumang bahagi ng complement system na nasa FBS [24], at iba pang potensyal na hindi kilalang mga inhibitor ng paglaki ng cell.
Bakit kailangan mong magpainit ng inactivate ang serum?
Ang layunin ng heat inactivation ay upang sirain ang complement activity sa serum nang hindi naaapektuhan ang growth-promoting na katangian ng produkto. Ang pag-alis ng aktibidad ng complement mula sa serum ay hindi kinakailangan para sa karamihan ng mga cell culture, ngunit maaaring kailanganin para sa mga kultura na sensitibo sa aktibidad ng complement.
Paano ka mag-iimbak ng init na hindi aktibo sa FBS?
Protektahan ang natunaw na FBS at iba pang sera na may ligtas na pagpapalamig atimbakan. Gumamit kaagad ng lasaw na serum. Ang likidong FBS at iba pang serum ay maaaring itago sa ref (2 hanggang 8 °C) hanggang apat na linggo.
